Criblage phénotypique de chimiothèques sur lignées immortalisées/modifiées :

• Caractérisation des modalités de mort cellulaire (apoptose, nécroptose, ferroptose, mort cellulaire immunogène)

• Etude et modulation des mécanismes de stress cellulaire (autophagie, stress du réticulum endoplasmique)

• Etude de toxicité sur organoïdes (organoïdes synthétiques, PDX/O et lignées issues de PDX/O)

• Etude d’infiltration immunitaire d’organoïdes traite par des agents anticancer 

Imagerie a haut-débit et haut-contenu

• Acquisition de plaques (format 96 ou 384-puits)

• Essais sur cellules fixées ou vivantes

• Acquisition jusqu’à 4 canaux de fluorescence et en lumière transmise

Notre plateforme de criblage cellulaire à haut-débit repose sur un ensemble d'équipements automatisés et parfaitement interconnectés, conçus pour garantir reproductibilité, rapidité et précision à chaque étape du processus expérimental.

Au cœur du dispositif, le bras robotisé Motoman (Beckman-Coulter) assure la liaison entre tous les postes de la plateforme : grâce à sa pince de haute précision et à ses déplacements programmables sur 3 axes et 3 angles, il transporte plaques, réservoirs et cônes d'un module à l'autre, en adaptant vitesse et trajectoire à chaque étape du protocole. L'automate de manipulation de liquides Biomek (Beckman-Coulter), équipé de ses têtes de pipetage AP96/AP384 et Span-8, réalise les ajouts et transferts de liquides ainsi que les dilutions en série sous atmosphère stérile, sur un deck de 18 emplacements pilotés par positionnement automatisé (ALP). La distribution rapide de réactifs, ainsi que l'ensemencement automatique des cellules, sont assurés par les deux MultiDrop (ThermoFisher), tandis que les lavages en série, indispensables dans les essais de biologie moléculaire, sont réalisés par le Washer 405LS (BioTek).

Le stockage et le conditionnement des plaques sont pris en charge par le Cytomat24 (ThermoFisher), qui assure un suivi rigoureux de chaque consommable, ainsi que par des enceintes thermo-régulées dédiées à la culture cellulaire (37 °C, 5 % CO₂) et à la conservation à 4 °C des réactifs. Les Delidding stations (Beckman-Coulter) complètent ce dispositif en assurant l'ouverture automatique des plaques, garantissant leur stérilité tout au long de l'expérimentation.

L'acquisition d'images repose sur cinq microscopes à épifluorescence ImageXpress® High-Content Imaging System (Molecular Devices) :

• deux systèmes widefield Micro XLS intégrés (souce lumineuse LED, caméra CMOS monochrome 16-bit, objectifs 10X/20X/40X PlanAPO, 5 jeux de filtres multibandes) ;                          

• un système widefield Micro XLS stand-alone (souce lumineuse LED, caméra CMOS monochrome 16-bit, objectifs 2X/10X/20X PlanAPO, 5 jeux de filtres multibandes, module de contrôle environnemental pour essais longue durée) ;      

• un système Micro Confocal (souce lumineuse LED, caméra CMOS monochrome 16-bit, objectifs 2X/10X/20X/60X PlanAPO, objectif 20X contraste de phase, 5 jeux de filtres multibandes, module de contrôle environnemental pour essais longue durée, module d’acquisition en lumière transmise,  double configuration spinning disk 60 µm/50 µm et mode widefield) ;   

• un système HCS.ai Advanced (source lumineuse laser, caméra sCMOS monochrome 16-bit à champ très large, objectifs 4X/10X à air, 20X/40X à immersion dans l'eau, 8 canaux de fluorescence, module de contrôle environnemental pour essais longue durée, module d’acquisition en lumière transmise, double configuration spinning disk 60 µm/50 µm et mode widefield).                   

Enfin, le spectromètre Spectramax i3X (Molecular Devices) complète les modalités d'acquisition par mesure d'absorbance, de fluorescence et de luminescence sur plaques 96 et 384 puits.

L'intégration logicielle de l'ensemble via le système SAMI EX (Beckman-Coulter) permet d'enchaîner automatiquement pipetage, distribution, lavage, incubation et acquisition sans intervention manuelle, offrant une solution complète, fiable et évolutive pour les campagnes de criblage cellulaire à haut-débit.

La plateforme propose un service intégré de criblage phénotypique à haut débit et à haut contenu dédié à l'étude des réponses cellulaires et à l'identification de composés bioactifs : robotique de manipulation d'échantillons, microscopie automatisée, imagerie de fluorescence multiplexée, imagerie sur cellules vivantes, pipelines computationnels et outils d'analyse de données assistés par intelligence artificielle. Le service inclut le développement et l'optimisation de tests cellulaires, l'automatisation des workflows expérimentaux, la réalisation de campagnes de criblage, l'acquisition et l'analyse d'images ainsi qu'un accompagnement méthodologique et analytique pour des projets académiques et industriels en pharmacologie, toxicologie et recherche translationnelle.